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TUhjnbcbe - 2021/8/24 21:27:00
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雏鹅痛风发病原因的探究及其综合防控技术

程凡玉倪满李雪吴承月余盈王旋*

(安徽科技学院动物科学学院)

随着近年来人们生活水平提高,对食物品质要求也在提高,鹅肉及其副产品的天然品质逐渐受到消费者的青睐。随着肉鹅养殖数量的增加,养殖的规模、养殖条件等也在悄然发生变化,规模化养鹅逐渐兴起,更多地采用网床和全价料模式饲养,养殖密集度在某些地区如安徽定远、五河,江苏盐城等地迅速增高,而一个新的疾病对雏鹅的威胁越来越严重,根据初步调查:在发病高峰期该病在养殖场的发生率达到了近50%,死亡率高达30-50%,主要发病鹅群为3周龄前的雏鹅,10-15日龄为死亡高峰期,且发病日龄有不断提前趋势,甚至在3-4日龄可见典型雏鹅痛风症状,即以关节、气管或内脏器官及其他间质组织蓄积大量尿酸盐为特征。从临床调查可知,该病的发生不分品种,呈广泛流传暴发势态,给养殖者造成了巨大困扰,给养鹅业造成了巨大损失。

为了更加深入了解雏鹅痛风发病的原因,我们收集了来自安徽定远、固镇、怀远、五河、明光、凤阳等地区的典型痛风病料,并对养殖场进行了探访,开展了关于雏鹅痛风的问卷调查及相关的试验。

在雏鹅痛风爆发并严重影响了鹅业发展的大背景下,我们针对雏鹅痛风的类型、雏鹅痛风的发病原因、雏鹅痛风的症状以及如何防治雏鹅痛风等设置了11个问题开展调查,结果如下:

1.问卷调查结果

针对雏鹅痛风是否为关节型、内脏型还是混合型上的选择上比较平均,实际发生情况是内脏型会更多一些;在探讨雏鹅痛风的发生原因时,大家更倾向于饲料营养因素和饲养管理因素,也体现了多数养户对这两方面的重视,但疾病因素在本病中占有更加重要的位置;在分析引起雏鹅痛风病原时,大家一致选择了星状病*和禽流感病*,说明大家对引起雏鹅痛风的病原越来越重视;在分析造成雏鹅痛风的环境因素中大家更倾向于温度高、湿度大;中*因素更加倾向于药物使用过度和霉菌*素中*;在雏鹅痛风患病的高峰期日龄上更加明确4-20日龄时雏鹅痛风的高发期;在雏鹅痛风上大家更倾向于减少高蛋白摄入、护肝通肾药物以及饲料结构的调整。

2.发病雏鹅在中前期日粮结构的调研结果

根椐养殖户反馈,我们收集了发生雏鹅痛风使用的饲料厂家饲料的主要指标,前期料粗蛋白含量=18%,粗纤维=7,粗灰分粗纤维=7-10;中期料蛋白含量=15-18%,粗纤维=7-10,粗灰分=10-15;以上均为雏鹅生长所需的正常指标。三个厂家具体指标如下:

2.1定远正虹饲料

前期料:

表1产品成分分析保证值

成分

含量

成分

含量

粗蛋白质=

18.0

总磷=

0.5

粗纤维=

7.00

氧化钠

0.20-0.80

粗灰分=

10.0

水分=

13.5

0.50-1.50

蛋氨酸

0.30-0.80

中期料:

表2产品成分分析保证值

成分

含量

成分

含量

粗蛋白质=

15.0

总磷=

0.50

粗纤维=

10.0

氧化钠

0.20-0.80

粗灰分=

15.0

水分=

13.5

0.50-1.50

蛋氨酸

0.30-0.80

主要原料组成:玉米、米糠、次粉、豆粕、磷酸氢钙、石粉、氯化钠、L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰及多种维生素(VA、VB1、VB6、VE等)等。

2.2固镇金豆饲料

前期料:

表3产品成分分析保证值

粗蛋白质=

粗灰分=

粗纤维=

总磷=

氯化钠

蛋氨酸

水分=

18.0

9.0

7.0

0.50-1.30

0.50

0.20-0.80

0.20-0.90

14.0

中期料:

表4产品成分分析保证值

粗蛋白质=

粗灰分=

粗纤维=

总磷=

氯化钠

蛋氨酸

水分=

15.0

15.0

10.0

0.50-1.30

0.40

0.20-0.80

0.20-0.90

14.0

主要原料组成:玉米、豆粕、石粉、磷酸氢钠、碱式氯化铜、硫酸锌、硫酸亚铁、硫酸锰、植酸酶、氨基酸、维生素等。

2.3凤阳百信饲料

前、中期料:

表5产品成分分析保证值

粗蛋白质=

粗纤维=

粗脂肪=

粗灰分

总磷=

氯化钠

水分=

蛋氨酸

18.0

7.0

2.5

10.0

0.60-1.40

0.50

0.30-0.80

10-3月份为13.5

4-9月份为13.0

0.40-0.80

主要原料组成:玉米、小麦、小麦次粉、豆粕、鱼粉、米糠、玉米蛋白粉、维生素预混剂、酶制剂、微生态制剂、防霉剂。

3.病原检测与分离3.1病料来源

38份患有痛风的雏鹅病料来源于凤阳、定远、固镇、怀远、明光、等地区。解剖后,收集肝脏、肾脏等典型病变组织,于-20℃冰箱中保存。

图1雏鹅关节型痛风

图2雏鹅内脏型痛风

3.2病料处理

将采集的有典型病变雏鹅的肝、肾等组织样品剪碎加入缓冲液,反复冻融3次以上,rpm高速度离心5分钟,取上清备用。

3.3cDNA的制备

按照OMEGA病*核酸提取试剂盒说明书提取病*总RNA,使用反转录试剂盒进行反转录,获取病*cDNA作为PCR模板。反转录条件,70℃5min,0℃1min,42℃30-60min,95℃5min,0℃1min,4℃无限循环。

3.4PCR扩增与鉴定

PCR反应条件,预变性95℃2.5min;变性95℃30s,退火55℃30s,延伸72℃30min,循环35次;72℃延伸10min,4℃停止反应。采用1.0%的琼脂糖凝胶电泳,通过凝胶成像系统对PCR产物进行鉴定,并将PCR产物寄送上海生物工程有限公司进行测序.。

电泳结果表明,38个样品中有17个星状病*检测为阳性。PCR产物测序结果表明,17个阳性样品有效测序结果为11个,对11个测序结果进行了系统发育进行化分树分析,如图3-6所示。

图3部分样品RT-PCR结果

结果显示:部分样品ASTV目的基因检测阳性,条带长度与预期一致。

图4部分样品测序结果

图个测序结果的同源性分析

结果显示:11个分离*株间的同源性较高,与鹅源星状病*同源性最高。

图个测序结果的系统进行发育分析

结果显示:新型鹅源星状病*株与已发表的鹅源星状病*分离株处于同一分支,关系最近,与火鸡源、鸭源星状病*关系较远。

3.5易感鹅胚接种

将38份病料中17份检测阳性的病料的研磨液无菌过滤,通过尿囊腔接种11日龄易感鹅胚,同时设生理盐水对照组,37.8℃孵育观察,每天早晚各照胚1次,弃掉24h内死亡鹅胚,连续观察7d,并做好记录。第二天鹅胚开始出现死亡,收集3~7d内死亡的易感鹅胚。

图7部分接种的易感鹅胚

3.6易感鹅胚病变

收集尿囊液和病变明显的组织脏器进行检测,均扩增出目的片段。死胚尿囊膜增厚,有尿酸盐沉积,死亡胚体出血、水肿,胚体内脏有白色尿酸盐沉积。

图8上排为阳性样品接种,下排为空白对照

4.动物回归试验

将40只1日龄健康雏鹅,随机分为2组,攻*组30只经皮下接种病*液,对照组10只以同样的方式和剂量接种生理盐水。每日观察雏鹅的临床症状和死亡情况,死亡雏鹅立即剖检观察病变。

1日龄健康雏鹅人工感染后,3d后开始出现死亡,病程约7-10d,耐过鹅生长缓慢。死亡雏鹅剖检变化主要表现为大量尿酸盐沉积。肉眼观察可见:肝脏轻度肿大、瘀血、质脆,心脏、肝脏及肠系膜等表面覆盖一层白色、豆腐渣样的尿酸盐,肾脏充血、水肿,剖开腕关节后,关节腔内可见白色黏稠石灰乳样液体。对照组雏鹅未见明显的临床症状,无死亡。

5.雏鹅痛风发病原因分析5.1疫病因素

自年以来我国部分地区发生了雏鹅痛风,使雏鹅的病死率达到了10%~50%,甚至更高。本项目实验检测表明,44.7%的病例检测到了鹅星状病*,此病*会导致雏鹅肝脏损伤、肾脏肿胀,相关功能衰退。据报道鹅源星状病*不仅水平传染性强,而且能够垂直传播,发病率与死亡率高,是目前鹅痛风病的一个主要病因。此外,禽流感病*、禽肾炎病*其他相关病*等都具有一定的嗜肾性,能引起肾脏功能性损伤,引发肾炎、肾功能障碍,在其他因素的共同作用下,最终造成尿酸盐的排泄障碍,并沉积在机体肌肉、内脏等多处而引起痛风。

5.2环境因素

舍内温度高、湿度大,再加上光照不足、通风不良、封闭式育雏舍雏鹅运动量较少、缺乏阳光照射,饲养密度过大,舍内有*有害气体浓度过高,均会造成雏鹅的抵抗力下降,环境因素促使病原菌大量繁殖,不利于雏鹅的生长发育,加重了痛风的发病率。

5.3饲养管理因素

鹅舍内环境污秽,卫生条件差,空气污浊,氨气浓度高;舍温不稳,忽冷忽热或过冷过热;雏鹅日粮中含盐量过高或饮水供应不足,还可损伤肾脏,浓缩尿液,减少尿量,从而使尿酸潴留,是引起尿酸血症而导致内脏型痛风发生的常见原因之一。

5.4饲料因素

饲喂高钙、高蛋白日粮,正常情况下通过肾脏代谢排出体外。如果雏鹅日粮中蛋白含量超过15%,肾脏代谢发生障碍,导致血液中尿酸水平过高,不能通过肾脏代谢排出体外的尿酸便以尿酸盐的形式沉积在关节、肌肉、肠系膜、腹膜以及肾脏、肝脏等脏器表面,进而引发慢性代谢性疾病即雏鹅痛风。集约化、规模化养殖模式下,缺乏鹅营养需求的基础研究,雏鹅日粮中含盐量过高或饮水供应不足,还可损伤肾脏,浓缩尿液,减少尿量,从而使尿酸潴留,是引起尿酸血症而导致内脏型痛风发生的常见原因之一。

5.5中*因素

某些具有肾*性的药物(如氨基糖甙类、磺胺类、呋喃类等)、肾*性植物*素和霉菌(如赭曲霉*素、*曲霉*素、卵孢霉素等)以及某些重金属,都可损害雏鹅肾功能而引起痛风。如长期使用磺胺类药物,又没有配合适量的碱性药物如小苏打等,就会导致磺胺类药物以结晶形式析出,沉积在肾脏、输尿管等处,使排泄障碍,引起痛风。饲料中的*曲霉*素可增加血液中的尿酸水平,从而引发痛风。

5.6遗传因素

有些品系的禽表现出痛风的先天遗传易感性,其肾小管对尿酸的分泌基因存在缺陷。根据调研,比如朗德鹅,在35日龄内较易发生痛风,而“三花鹅”、“皖普鹅”、“江淮鹅”、“泰州鹅”等主要发生在20日龄以内。

6.雏鹅痛风综合防控技术6.1预防雏鹅痛风技术方案

在充分考虑疫病、环境、饲养管理、饲料、中*、遗传等因素的基础上,并经实践验证调研,针对雏鹅痛风制定如下综合防控方案:

①加强雏鹅舍环境卫生,争取做到周周消*,消*无死角。

②有效降低雏鹅生产密度,保证饮水充足,注意通风等措施。

③严把饲料质量关,杜绝使用陈化粮、变质粮,加大青绿饲料饲喂的比重。

④合理使用雏鹅开口药物。如使用阿莫西林、粘杆菌素、溶菌酶、中药等对肝肾影响较小的药物,20日龄以内尽量减少或避免使用任何肝肾*性大的药物。

⑤早期注射星状病*抗体。早期使用星状病*抗体进行被动免疫,可以有效阻断该病*在体内的复制,减少肝肾损伤,使用量为3日龄雏鹅1.0ML/只。

⑥二次使用星状病*抗体进行被动免疫。针对经常发生该病场地的雏鹅,需要进行第2次星状病*抗体被动免疫,使用量为9日龄雏鹅1.5ML/只。

⑦使用护肝通肾药物。在雏鹅7日龄后,可间断性使用小苏打、乌落托品、五苓散等进行通肾利尿,使用葡萄糖氧化酶、*芪、甘草等进行护肝解*。

6.2发生雏鹅痛风的解决方案

①首先降低日粮蛋白质含量,添加适量碎玉米、麦麸或碎米等低蛋白饲料,并供给青绿多汁饲料。

②使用护肝通肾药物解*并促进尿酸盐排泄,同时补充葡萄糖、多维等,缓解雏鹅死亡,连用4天以上。

③使用*芪、淫羊藿等中药,使用球蛋白、多肽因子等生物制剂等提高雏鹅免疫力,使用溶菌酶、益生菌或中药等,减少雏鹅并发症的发生,连用3天以上。

④为减少注射应激导致大量伤亡,在使用护肝通肾药物缓解病症1-2天后注射鹅源星状病*抗体,阻断病*传播,减少痛风发生,根据雏鹅日龄大小注射量控制在1.5-2.0ML/只。

⑤控制雏鹅痛风后,在之后10天内的用药过程中也应注意用药种类、用药剂量的控制,用药同时使用护肝通肾药物,避免痛风复发。

7.存在的问题

(1)鹅痛风已在我国多地区发生,其发病原因复杂。本研究表明,星状病*感染是发生雏鹅痛风的主要病原,但不是唯一病原,有约53%的痛风病例与星状病*感染无关,还存在哪些病原或致病因素,有待进一步研究。

(2)缺乏星状病*疫苗或正规的抗体制剂,加快相关产品的研制迫在眉睫;相关抗体制剂市场混乱,产品质量良莠不齐,给养殖户带来了巨大困惑。

(3)简单的控料与利尿通肾有一定效果,并不能完全阻止雏鹅痛风的发生。

参考文献

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